一連串不可思議的瘋狂邪惡事件，在「Vannacutt凡納克精神療養院」里默默進行著。長久以來「凡納克精神療養院」都進行著秘密生化試驗。在凡納克博士主持下，研究員以各種藥物試驗人類所能體會的瘋狂極限，不過當年所有的秘密，以及那時的那些犧牲者，研究員與實驗藥物都已經消失，早已經沒有人知道過去發生在《猛鬼屋》中的事情。任何能證明當年凡納克博士瘋狂實驗的證據都不復存，現在只剩下荒棄的「凡納克精神療養院」遺址，以及當地人的口耳相傳。所有的恐怖秘密都隨著《猛鬼屋》的荒廢日久為人所遺忘……

　　許多年後，五個不知情的陌生人受邀到《猛鬼屋》中待上一晚，代價是每個人都可以得到美金一百萬元做為犒賞，因為對凡納克博士的恐怖行徑一無所知，所以他們本來都深信自己能活著見到明天的太陽，順利地取得美金一百萬元的獎勵，哪里知道，猛鬼屋的當夜將會是它們這輩子最漫長的夜晚……

　　為了想要滿足他那腦中充滿了奇怪扭曲愿望的老婆艾芙琳（芬卡珍森飾），百萬富豪主題樂園的顯要人物史提夫·布萊斯（杰佛瑞羅許飾），開始籌備他妻子的生日派對時，就突發奇想地想要在廢棄的《猛鬼屋》中舉行。他不曉得那里就是當年凡納克博士所留下，在過去曾是許多瘋狂生化實驗的遺跡。

　　當參加派對的客人們，陸續在傍晚抵達後，史提夫很訝異地發現其中有五個陌生人，他們既非艾芙琳的客人也不是他請來的。史提夫不知道他們從何而來也不知道他們是誰，當然這些客人們對彼此也都一無所知，即使夫妻兩人對這五人存有疑問，史提夫仍然和艾芙琳熱忱的歡迎他們，而事實上這五人的真正來意也將在之後被證實。史提夫後來宣布，若有人打算在《猛鬼屋》中待上一整夜，只要能幸存就可得到一筆豐厚的賞金，實際上他早在屋子里秘密地安排了一些機關，去驚嚇那些前來的挑戰者，不過他的詭計很快就證明根本沒有意義，因為《猛鬼屋》里就自動地開始發生一些恐怖的怪事。

　　《猛鬼屋》內深鎖的各種機關被重新啟動　而且捕獲了每個人，這五個向《猛鬼屋》挑戰的人，早就忘了原來的一百萬元，開始掙扎尖叫不顧一切地向外找活路　。情況其實正像《猛鬼屋》的繼承人，原來的屋主華森·布里喬（克里斯克登飾）在事前曾經預言地一般，其實這棟屋子本身就透露出一股邪惡，在這場惡夢結束前，在太陽即將破曉而出的黎明之際，這些絕望的客人們，終將會揭開《猛鬼屋》中最終極的秘密。

　　Vannacutt精神病院中發生了一系列恐怖、罪惡的事，所有受害人和醫生都已經死亡，這宗陰森、罪惡的事就被掩蓋了。但這所建筑記錄下了一切。

　　Vannacutt精神病被關閉的幾十年后，有五個人應邀來到這座房子，只要他們能熬過一夜，就能得到一大筆錢。于是漫漫長夜開始了。

　　億萬富翁Steven Price準備在精神病院里為妻子Evelyn開個特別的生日晚會，當客人們到來時，主人奇怪地發現這五人根本不是受邀請人，而這五人也同樣奇怪他們為什么會受到邀請。但是Price還是宣布只要能在這里呆過一晚的人就可以得到錢。他設計了種種可怕的機關，希望客人們能夠被嚇走，可惜并沒有什么效果，精神病院中真正的恐怖開始了。

　　房子的鎖定機關不知為什么突然啟動，將所有人關在了里面，人們絕望地尋找著出路。當一晚的惡夢過去后，精神病院中原來的罪惡和秘密得到揭示……